Acta Neuropathologica: MAP激酶p38γ降低tau介导的晚期记忆缺点

阿尔茨海默小儿（AD）是最常见的痴呆症，其特征是细胞内除此以外淡褐色含有淀粉样蛋白β（Aβ）和由骨骼肌元tau蛋白看成的脂质缠结。尽管我们对哮喘系统的阐释有所减低，但是通过靶向Aβ或其从淀粉样样前质蛋白（APP）中会加工来疗法AD的作法在大型临床研究中会并未显著的益处。因此，近来对哮喘系统和疗法发展的探索主要比较大会在tau。AD的各个方面可以在骨骼肌元中会表达生物APP的果蝇三维中会进行建模。APP转DNA果蝇展现为淀粉样淡褐色的受虐沉积。

我们以前已经断言，启动子依赖性tau激酶可以抑制作用淀粉样蛋白β（Aβ）诱导的危险性回波。大脑皮层后体细胞原激活蛋白（MAP）激酶p38γ内皮细胞了胺基-205（T205）上tau的启动子依赖性激酶。使用DNA疗法的作法，我们并用这种骨骼肌庇护所系统来改善两种Aβ依赖的AD果蝇三维在晚期梦境缺失过渡期的梦境。tau中会靶向T205的大脑皮层后激酶p38γ活性的减低降低了有症状的Aβ诱导的AD三维的梦境缺失。用野生型人tau或激酶缺失tau T205A进行的再度组建实验表明，T205粘贴对于p38γ的下游振荡至关重要，p38γ可以防止APP转DNA果蝇的梦境语言障碍。此除此以外，对果蝇MaptDNA中会T205密码子的DNA组编辑表明，抑制tau中会的单侧多肽对APP转DNAAD果蝇的梦境缺失不具关键性的平衡作用。在表达非流感小儿毒tau的tau转DNA果蝇三维中会，通过DNAp38γ缺失去除p38γ活性的庇护所作用，使tau不具危险性，并导致生物Aβ缺失时梦境系统受损。因此，我们认为，平衡骨骼肌元p38γ的活性是一种内在的tau依赖性疗法作法，可以增强晚期痴呆症病征的受损概念化。

作法：从大脑皮层组织中会纯本土化大脑皮层质的作法如前所述。简单地说，使用预先凝固的匀浆器在30 mg 组织/毫升的冰镇原料缓冲液中会平滑本土化。通过离心（1400g，10min，4°C）清空匀浆后，将微粒再度胶质在原料缓冲液中会并再次离心（1400g，10 min，4°C）。改组上清液，再次离心，并在4°C下在13800 g下螺旋上清液（总脑匀浆）10分钟。将微粒再度胶质在原料缓冲液中会，低层并在4°下以45000g离心45分钟。将Pellet再度胶质在5%的Ficoll中会，在13%的Ficoll上低层，在4°C下以45000g下离心45分钟。收集编辑器（大脑皮层质），在5%的Ficoll中会混合物，45°C下离心，收集上清液（非大脑皮层）并在pH8缓冲液中会洗涤硫酸盐并再度胶质在pH8缓冲液中会，从而看成凸的大脑皮层质裂解物。在制备使用蛋白质印迹的样品之前，量度不同溶剂的蛋白质含量。

综上所述，我们的研究表明，通过大脑皮层后激酶p38γ靶向启动子依赖性tau激酶是一种潜在的疗法作法，须要现有Aβ诱导的AD果蝇三维的梦境语言障碍。通过DNA疗法媒介减低p38γ的活性是人身安全的，并且不会促使tau小儿理学转变，包括在颇高tau程度情况下。先前，我们发现p38γ在欠缺颇高Aβ程度的情况下约束了tau依赖性梦境细菌感染，赞成p38γ对tau危险性的直接影响。

Ittner, A., Asih, P.R., Tan, A.R.P. et al. Reduction of advanced tau-mediated memory deficits by the MAP kinase p38γ. Acta Neuropathol 140, 279–294 (2020).